葉雷 劉定權(quán) 趙建龍 李小林
四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所
四川烏蒙山四季菌業(yè)有限責(zé)任公司
《南方農(nóng)業(yè)》2019年31期
摘 要
簡(jiǎn)介 黑皮雞樅生物學(xué)特性，以及工廠化液體菌種制備、工廠化制袋及接種、發(fā)菌及菌絲后熟管理等技術(shù)要點(diǎn)。從覆土材料選擇及預(yù)處理，設(shè)施廠房層架排袋，出菇管理及病蟲害防控，采收和貯運(yùn)幾個(gè)方面闡述了從生產(chǎn)實(shí)踐中總結(jié)提煉出的工廠化出菇關(guān)鍵技術(shù)。
關(guān)鍵詞 黑皮雞樅；工廠化生產(chǎn)；關(guān)鍵技術(shù)
黑皮雞樅菌是四川近幾年得以快速發(fā)展的人工可栽培珍稀菌類之一，其子實(shí)體富含多糖、氨基酸和微量元素等，可生食，同時(shí)菌絲體發(fā)酵物和子實(shí)體含長(zhǎng)根菇素（小奧德黃酮），具有抑制霉菌等生長(zhǎng)和降低人體血壓的作用。四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所早在2000年就選育出了黑皮雞樅新品種[1]，對(duì)該類菌株的碳源、氮源、酸堿度、溫度等栽培特性進(jìn)行了全面研究[2-3]，并在德陽(yáng)、廣元和成都等地推廣應(yīng)用，至今每年都有小規(guī)模的農(nóng)法栽培。隨著科技的進(jìn)步，工廠化生產(chǎn)成為食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的新方向。本文系對(duì)黑皮雞樅工廠化生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)的總結(jié)提煉。
1 生物學(xué)特性
黑皮雞樅菌（Oudemansiella radicata），又名長(zhǎng)根金錢菌、露水雞樅、長(zhǎng)根小奧德蘑等[4]，屬中偏高溫型菇類，為擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina）、傘菌目（Agaricales）、白蘑科（Tricholomataceae）、小奧德蘑屬（Oudemansiella）的腐生菌[5]，野生種在四川、云南、廣西、河南和安徽等地有分布。其菌絲體喜pH值5.5～6.5的微酸性環(huán)境[6]，菌絲體生長(zhǎng)溫度5～35℃，最適溫度18～25℃；子實(shí)體發(fā)生及發(fā)育的溫度15～32℃，最適出菇溫度22～27℃；菌絲有后熟特性，一般要經(jīng)過30～40d的生理成熟期；喜覆土出菇，但不覆土也可少量出菇。
2 工廠化液體菌種制備
2.1 母種制作
母種制作多選用固體斜面培養(yǎng)基或固體平板進(jìn)行，常用培養(yǎng)基配方為：1）馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，pH自然，加水至1L[7]；2）馬鈴薯180～210g，麥麩25～30g，葡萄糖15～20g，磷酸二氫鉀1～3g，硫酸鎂0.5～1.0g，維生素B<sub>1</sub>5～10mg，瓊脂18～22g，pH值5.5～7.0，加水至1L。
培養(yǎng)基制作按照常規(guī)方法進(jìn)行。生產(chǎn)用菌種應(yīng)選擇無雜菌、純度高、活力強(qiáng)的菌株。長(zhǎng)期不用的菌種應(yīng)采用蒸餾水法、液氮保存法等方式進(jìn)行低溫保存。
2.2 液體菌種制備
2.2.1 一級(jí)搖瓶菌種制備
多采用容量1L的三角瓶進(jìn)行，其部分液體培養(yǎng)基如下：1）玉米粉2～4g，酵母膏3～4g，蔗糖18～22g，磷酸二氫鉀0.2～0.5g，七水硫酸鎂0.5～1.0g，維生素B18～12mg，消泡劑（聚二甲基硅氧烷乳液）0.2～0.4mL，輕質(zhì)碳酸鈣適量，pH值調(diào)整至6.5左右，加水至1L。2）豆粕粉3～7g，葡萄糖15～25g，磷酸二氫鉀0.5～1.0g，七水硫酸鎂0.5～1.0g，維生素B18～12mg，消泡劑（聚二甲基硅氧烷乳液）0.2～0.4mL，輕質(zhì)碳酸鈣適量，pH值調(diào)整至6.5左右，加水至1L。
按照配方組分配制液體，在磁力攪拌器上加熱攪拌后分裝在容量為1L的三角瓶中，液體裝量為三角瓶容量的45%以下，蓋好硅膠瓶塞，放在高壓滅菌鍋中按照張偉[8]所述的方法進(jìn)行滅菌后，取出培養(yǎng)基放置在干凈的超凈工作臺(tái)上冷卻。
待液體溫度冷卻至28℃以下即可開展接種，整個(gè)接種過程采用無菌操作流程，將固體培養(yǎng)基上的菌絲體用接種工具劃為3～5mm×3～5mm×0.1～0.2mm的接種塊，接種量控制在5～20塊/瓶，然后將接種塊轉(zhuǎn)移到液體培養(yǎng)基中，瓶口用無菌硅膠塞蓋緊，然后放置在黑暗的搖床上搖瓶培養(yǎng)。
搖床參數(shù)：溫度22～25℃，濕度自然，無光，轉(zhuǎn)速90～160r/min。一般培養(yǎng)6～7d，質(zhì)量檢測(cè)合格后即可用于后續(xù)深層發(fā)酵接種。對(duì)不能及時(shí)使用的菌種，可先暫時(shí)存放在4℃冰箱，但是不能長(zhǎng)時(shí)間存放。
2.2.2 液體菌種培養(yǎng)罐深層發(fā)酵
采用專業(yè)的食用菌液體菌種深層發(fā)酵培養(yǎng)罐進(jìn)行液體菌種擴(kuò)繁。所用液體培養(yǎng)基配方與一級(jí)搖瓶菌種用液體一致，按照組分進(jìn)行擴(kuò)大配制，采用成套設(shè)備對(duì)液體培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌并冷卻到28℃以下，用無菌方式將培養(yǎng)基導(dǎo)入深層發(fā)酵培養(yǎng)罐，并對(duì)液體進(jìn)行合格檢測(cè)，對(duì)合格液體按照無菌操作流程將上述一級(jí)搖瓶菌種接入一級(jí)發(fā)酵罐中，一般1～3瓶接種1罐（100L液體），且將接種后的三角瓶殘液在超凈臺(tái)內(nèi)接入肉湯培養(yǎng)基和PDA斜面試管等，置于(37±1)℃培養(yǎng)，16～48h后觀察是否有雜菌生長(zhǎng)，有條件可進(jìn)行顯微鏡染色檢測(cè)。
設(shè)置培養(yǎng)罐參數(shù)：控制罐壓0.02～0.05MPa，轉(zhuǎn)動(dòng)頻率25～30Hz，溫度25℃，根據(jù)罐體中菌絲量適當(dāng)調(diào)整通氣量，液體與通氣比一般為1∶(0.2～0.5)。
一級(jí)發(fā)酵罐一般培養(yǎng)(5±1)d可達(dá)到菌絲體積占比8%以上的接種濃度，即可用于二級(jí)深層發(fā)酵罐（一般選擇1000L或者1500L的罐）接種，接種量10%左右；二級(jí)罐參數(shù)按照一級(jí)罐相同設(shè)置，一般培養(yǎng)4d即可達(dá)到接種濃度，用于料袋接種。
3 工廠化制袋及接種
黑皮雞樅生產(chǎn)均采用袋料栽培，采用工廠化專業(yè)機(jī)械進(jìn)行拌料、裝袋、滅菌、接種等。部分主要生產(chǎn)配方如下：
1）雜木屑75～78份，麥麩(或米糠)12～15份，玉米粉6～8份，過磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2份；
2）棉籽殼78～82份，麥麩(或米糠)10～12份，玉米粉5～8份，蔗糖1份，過磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2份；
3）雜木屑60～65份，玉米芯15～20份，麩皮（或米糠）15～18份，蔗糖1份，石膏粉1份，石灰3份；
4）棉籽殼50～60份，木屑25～35份，米糠10～13份，石膏1份，過磷酸鈣1份，石灰3份；
5）棉籽殼78～82份，豆粕5～8份，玉米芯10～15份，玉米粉2.5～3份，過磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2.5份。
按照配方稱取各種原料，先將主料干拌均勻，再加入其他輔料混合，并調(diào)節(jié)基質(zhì)水份至55%～65%（重量比）。一般采用規(guī)格15cm×33cm×0.004cm的聚丙烯料袋裝料，重量約1.15～1.25kg/袋，料袋可選用套環(huán)或窩口方式進(jìn)行生產(chǎn)。裝袋完畢后，進(jìn)行高壓滅菌，維持溫度125℃、2h，自然冷卻4～8h，趁熱出鍋，放置在經(jīng)消毒處理的冷卻室，采用降溫設(shè)備對(duì)料袋進(jìn)行降溫，使得袋料中部溫度在28℃以下即可開展接種工作。料袋接種采用專業(yè)接種機(jī)械進(jìn)行，控制接種量為液體菌種25～30g/袋。
液體接種機(jī)"液體接種機(jī)"
液體接種機(jī)
4 發(fā)菌及菌絲后熟管理
培養(yǎng)房須提前3～7d清洗消毒，接種的料袋移入后，控制環(huán)境溫度(22±3)℃，空氣相對(duì)濕度75%左右，黑暗無光，適當(dāng)通風(fēng)換氣。菌袋培養(yǎng)過程中，盡量減少人為走動(dòng)，避免人為因素影響發(fā)菌效果，還要定期清理雜菌污染袋?？販嘏囵B(yǎng)條件下，30d左右菌絲即可滿袋，但是滿袋后不能急忙用于出菇，應(yīng)繼續(xù)低溫培養(yǎng)菌袋，將環(huán)境溫度調(diào)控至(13±2)℃，約維持20～30d，當(dāng)基料表面出現(xiàn)黑褐色條紋或出現(xiàn)凸起原基時(shí)，即可結(jié)束培養(yǎng)，轉(zhuǎn)入出菇環(huán)節(jié)。
5 工廠化出菇關(guān)鍵技術(shù)
5.1 覆土材料選擇及預(yù)處理
5.1.1 覆土材料選擇
黑皮雞樅覆土出菇是最理想的出菇方式，可大大提高出菇單產(chǎn)。所選覆土材料可為土壤、泥炭土、珍珠巖、腐殖質(zhì)等，為了方便一般選用土壤進(jìn)行覆土，所選土壤要求質(zhì)地疏松，透氣性好，有機(jī)質(zhì)含量豐富，以沙壤土為最佳。
5.1.2 覆土材料預(yù)處理
覆土前5d左右，將沙壤土撒布石灰粉和噴施高效綠霉凈進(jìn)行拌勻消毒，控制含水量在30%左右，pH值為8～10，然后悶堆并用薄膜覆蓋2～3d，使用前一天測(cè)定土壤酸堿度，調(diào)整pH值為7.0～7.5，即可用于后續(xù)覆土或墊土。
5.2 設(shè)施廠房層架排袋
黑皮雞樅工廠化出菇均采用層架式出菇，其目的是提高單產(chǎn)，一般分為3～6層，單層層架長(zhǎng)30～40m，每層放置2000～2500個(gè)菌包，一個(gè)出菇房放置1.2萬(wàn)～1.8萬(wàn)個(gè)菌包。在準(zhǔn)備用于出菇前3～5d，用防霉、防蟲藥劑對(duì)菇房出菇層架、地面、墻體等進(jìn)行消毒處理，然后再擺袋出菇。根據(jù)栽培出菇是否脫袋，分為脫袋出菇和袋內(nèi)出菇兩種。"
5.2.1 脫袋出菇
是一種將菌袋的塑料袋人工去除，再進(jìn)行覆土出菇的一種方式，因該種方法可增加出菇面積，間接提高出菇產(chǎn)量，是四川地區(qū)的主要栽培方式。
首先在出菇房中的潔凈層流罩下方采用無菌刀片將菌絲生理成熟了的菌袋表面聚丙烯料袋脫下，將菌棒放置在消毒處理了的塑料托盤中，裝滿后用平板拖車轉(zhuǎn)移至出菇種植架，采用機(jī)械臂或者人工將菌棒排列在底部鋪有約5cm厚經(jīng)處理過的土壤上，垂直放立一般一排排列9個(gè)（菌棒間距3cm左右），使得整個(gè)脫袋菌棒鋪滿種植床架，然后將覆土土壤填滿菌棒間隙，并覆蓋約5cm厚的土壤。待后續(xù)出菇管理。
脫袋層架覆土栽培"脫袋層架覆土栽培"
5.2.2 袋內(nèi)出菇
是一種不用脫去菌袋的塑料袋而直接在菌袋一端開口進(jìn)行覆土出菇的方式，該方式過程簡(jiǎn)單，處理廢棄菌渣容易，但由于出菇面積相對(duì)較小，單產(chǎn)相對(duì)于脫袋覆土略低。將菌絲生理成熟了的菌袋一端開口，用處理過的土壤覆蓋約5cm厚，將開口菌袋垂直均勻地?cái)[放在出菇房的床架上。待后續(xù)出菇管理。
5.3 出菇管理及病蟲害防控
無論是脫袋出菇還是袋內(nèi)出菇，在工廠化出菇房中完成菌袋覆土后，都須對(duì)覆土進(jìn)行澆水，所用水均為澄清石灰水（pH值7.0～7.5）；維持土壤含水量約25%左右，土壤溫度23～27℃，空氣相對(duì)濕度80%以上，1500～2000lx光照，注意通風(fēng)，15～25d即可出現(xiàn)大量原基，原基長(zhǎng)出后，要增加噴水次數(shù)，以細(xì)噴多次為原則，且宜在早晚噴。菇蕾繼續(xù)生長(zhǎng)5～10d，八分熟以前采收，采收完一茬停水養(yǎng)菌約5d進(jìn)入下一潮菇的管理。
在出菇期病蟲害防控上，以預(yù)防為主，在出菇房中放適量黃板、殺蟲燈、誘殺劑等，發(fā)現(xiàn)病蟲害立即隔離處理，如出現(xiàn)黏菌（見圖4左）等為害，可在其發(fā)生區(qū)撒入適量生石灰，營(yíng)造強(qiáng)堿性環(huán)境加以控制；跳蟲（見圖4右）體表為油質(zhì)，藥液很難滲入體內(nèi)，應(yīng)以預(yù)防為主，多在出菇房放置黃板，在出菇前對(duì)菇房進(jìn)行熏蒸消毒。
5.4 采收和貯運(yùn)
當(dāng)菌蓋開傘5～8成時(shí)即判定子實(shí)體可采收。采收時(shí)單手握住菌柄，輕輕向上旋轉(zhuǎn)拉出整個(gè)子實(shí)體，然后均勻放置在潔凈的托盤中，采收后立即放置在4℃冷卻室中預(yù)冷，再立即用小刀削去菌柄基部泥土及其“根”，再進(jìn)一步進(jìn)行分級(jí)。
分級(jí)完成的菇按照一定重量規(guī)格打包進(jìn)行冷鏈鮮銷，保藏庫(kù)溫度0～4.0℃，無光，空氣相對(duì)濕度80％左右，一般保鮮期可達(dá)8～10d。目前，四川省已在敘永縣麻城鎮(zhèn)建成食用菌工廠化生產(chǎn)基地，產(chǎn)品在本省銷售，同時(shí)遠(yuǎn)銷北京、廣東、上海、重慶等市場(chǎng)，供不應(yīng)求，市場(chǎng)前景廣闊。
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