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專家團

丁志敏

張勇

黃海洋

專家公告

食用菌栽培應(yīng)該以"預(yù)防為主"食用菌栽培應(yīng)該以"預(yù)防為主"作為指導(dǎo)方針，以過硬的技術(shù)支持、嚴格的操作管理以及規(guī)范而不失靈活的管理方式為基礎(chǔ)。許多行業(yè)專家多年的實踐經(jīng)驗證明，只要按照食用菌生長允許的條件，做好各個環(huán)節(jié)的控制和管理，就可以達到理想的生產(chǎn)效果，收獲符合安全標準的質(zhì)量好、產(chǎn)量高的食用菌產(chǎn)品。

羊肚菌母種的組織分離技術(shù)

發(fā)布時間：2023-03-13

來源：中國食用菌商務(wù)網(wǎng)

組織分離是一種用子實體的某一部分來分離菌種的方法。因為組織分離法操作簡便，不易帶入雜菌，容易獲得純菌種。后代不易發(fā)生遺傳重組等變異，能保持原菌株的優(yōu)良特性。因此組織分離是目前應(yīng)用最廣泛的分離手段。

組織分離的方法：

1.選擇無污染并菇形健壯的蘑菇幼菇（6分成熟），采摘后及時放入滅過菌的紙袋中帶回接種室，連同母種用試管培養(yǎng)基等用品一起放入接種箱或超凈工作臺內(nèi)消毒。

2.先用75%的酒精消毒雙手，將鑷子、接種鏟、小刀等接種用用具用酒精消毒，用酒精棉擦一下，拿到酒精燈上燒一下。

3.用略干的酒精棉球?qū)⒆幽夜貏e是基部與土壤交界處的灰塵或泥土擦拭干凈，擦拭過程中及時更換酒精棉球。

4.切開羊肚菌，切取菌柄與菌蓋交接處組織較厚的部位，什么地方肉厚用什么地方，切取菌柄2-5mm組織塊2-3塊，用鑷子夾住，將組織塊在無菌水中涮一下，并在酒精燈上快速過幾下。（過程中少用升汞或酒精消毒，避免將羊肚菌菌絲全部殺死。）

5.將組織塊放入培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在22-25℃避光培養(yǎng)，2-3天萌發(fā)出新菌絲，新菌絲長到培養(yǎng)基上，48小時后，此時菌絲長約0.2-0.4 cm，菌絲粗壯；56-72小時后，成功萌發(fā)的菌絲將長至0.5-1.5cm長，菌絲纖細，無色，不濃密，前端近似整體，根根分明，此時可挑取菌落尖端進行挑出純化。

6.純化后的試管要貼上標簽，注明接種日期和品種的名稱。

7.純化的羊肚菌12 h左右，可見到從接種塊萌發(fā)到培養(yǎng)基上的新生菌絲，7天左右長滿試管，并出現(xiàn)白色菌核，10天左右，小菌核由初始的白色，逐漸變淺黃、變大；培養(yǎng)15天左右后可放4度冰箱保存。

得到純菌種后進行轉(zhuǎn)管操作，15-18天菌絲即可長滿試管，挑選菌絲健旺、無污染的菌管再進行轉(zhuǎn)接擴繁，須經(jīng)出菇試驗合格后用于生產(chǎn)。

羊肚菌皮薄，遇水，酒精不會萌發(fā)。根據(jù)以上方法，可進行多次試驗。（從業(yè)者需根據(jù)實驗操作來調(diào)整相關(guān)細節(jié)，以上操作僅供參考。）

注：羊肚菌作為一種子囊菌，與其他食用菌相比最大缺點是容易退化，變異和生霉。因此，分離菌種要進行出菇和比較試驗。

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羊肚菌母種的組織分離技術(shù)