近年來，隨著市場對香菇多糖需求量的增大，利用液體深層發(fā)酵培養(yǎng)香菇菌絲體的研究逐漸增多，但以豆渣為主料液體深層培養(yǎng)香菇菌絲體的研究尚未見報道。為此，筆者利用豆渣及洗渣水，應用正交試驗法對香菇液體發(fā)酵最佳培養(yǎng)基及發(fā)酵條件進行篩選研究，旨在二次利用豆粉生產(chǎn)的下腳料—豆渣，同時為香菇液體發(fā)酵尋求一種新的原料，節(jié)約糧食資源。
1 材料與方法
1.1材料
1.1.1菌種
香菇（L109）由佳木斯大學生命科學學院微生物實驗室保存。
1.1.2培養(yǎng)基
改良PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯20g（煮汁），麩皮5g（煮汁），葡萄糖2g,瓊脂2g,水100 mL,121 ℃下滅菌20 min。
種子培養(yǎng)基：麩皮5g（煮汁），葡萄糖2g,洗渣水100mL,0.1MPa滅菌15min。
發(fā)酵培養(yǎng)基：洗渣水100 mL,MgSO4、葡萄糖、KH2PO4和豆渣的配量經(jīng)正交試驗確定，0.1 MPa滅菌15 min。
對比培養(yǎng)基:葡萄糖2.0g,黃豆粉2.0g,KH2PO4 0.1g,MgSO4 0.1g,水100 mL,0.1 MPa滅菌15 min。
1.2方法
1.2.1原料的制備
豆渣（即豆粉生產(chǎn)的下腳料）：大豆加水磨漿，分離豆乳后剩余的固形物（含水約87%）。
洗渣水：豆渣加1~2倍重量的水，攪拌均勻后，過濾得到的濾液。
1.2.2菌種活化
將香菇菌種轉接至改良PDA斜面培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱25 ℃恒溫培養(yǎng)6~7d,菌絲長滿試管。
1.2.3液體種子的制備
250 mL三角瓶裝種子培養(yǎng)基80 mL,加玻璃珠4~5粒，接入3塊黃豆粒大小的香菇活化菌種，于180 r/min旋轉式搖床25 ℃震蕩培養(yǎng)5~6 d即可。
1.2.4發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化
應用正交試驗法對香菇液體發(fā)酵培養(yǎng)基的4種營養(yǎng)物質葡萄糖、MgSO4、KH2PO4和豆渣在3個水平上進行正交試驗。選擇正交試驗進行發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化。
1.2.5發(fā)酵條件的優(yōu)化
應用正交試驗法對發(fā)酵時間、裝液量以及發(fā)酵溫度3個因素在3個水平上進行正交試驗，選擇正交試驗進行發(fā)酵條件的優(yōu)化。
1.2.6對比試驗
分別采用優(yōu)化后的液體發(fā)酵培養(yǎng)基和對比培養(yǎng)基，在優(yōu)化的發(fā)酵條件下進行發(fā)酵試驗，對比菌絲體生物量和生物轉化率。
1.2.7菌絲體生物量的測定
發(fā)酵液經(jīng)兩層紗布過濾得菌絲體，菌絲體經(jīng)蒸餾水沖洗數(shù)次后，于60 ℃干燥至恒重，電子天平稱重，測得菌絲體生物量。
1.2.8生物轉化率的計算
生物轉化率（%）=菌絲體干重培養(yǎng)基中碳氮源干重×100;培養(yǎng)基中碳氮源干重=碳源重量×（1-碳源含水量%）+氮源重量×（1-氮源含水量%）。
2 結論與討論
利用豆渣及洗渣水進行液體培養(yǎng)香菇菌絲體的最佳培養(yǎng)基配方為：葡萄糖2%,豆渣9%,MgSO4 0.05%,KH2PO4 0.1%,以洗渣水代替水進行配料；實驗室最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵時間?6 d,裝液量80 mL/250 mL三角瓶，發(fā)酵溫度25 ℃。
利用豆渣和洗渣水培養(yǎng)香菇菌絲體經(jīng)實驗室研究證實工藝可行，工業(yè)化利用豆渣及洗渣水液體培養(yǎng)香菇菌絲體的工藝條件尚需放大實驗研究獲得。
以豆渣及洗渣水為原料培養(yǎng)香菇菌絲體，發(fā)酵液變透明，說明菌絲體生長過程中可以利用大豆纖維、大豆蛋白和大豆多糖等大分子物質。
利用豆渣和洗渣水培養(yǎng)的香菇菌絲體與野生香菇的營養(yǎng)成分異同還有待進一步研究。
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